Heilbrigðisskýrslur - 05.12.1982, Page 15

13
EFNI OG AÐFERÐIR
Til mótefnamælinga var valið HI-(hemagglutination-inhibition)
blóðvatnspróf, sem byggist á því að inflúensuveiran vekur í
mannslxkamanum upp myndun Hl-mótefna, sem bindast hemagglutinunum
á yfirborði veirunnar og koma þannig í veg fyrir samloðun blóð-
korna (hemagglutination) af hennar völdum. Próf þetta er mjög
nsemt og sérhæft og jafnframt tiltölulega einfalt í framkvæmd,
fljótlegt og ódýrt.
Meðferð serma
Blóðsýni voru tekin í lofttasmd glös (Vacutainers) sem aldrei
þurfti að taka úr tappann fyrr en þau komu í rannsóknastofuna.
Þar voru sýnin skilin í sömu glösunum við um 3000 snúninga á
mínútu í 10 mínútur. Sermið var svo veitt ofan af blóðkögglinum
og geymt við - 25°C. Sermi af þeim sýnum, sem tekin voru í Reykja-
vík og nágrenni, voru ávallt komin í frysti áður en 8 klst. voru
liðnar frá blóðtökunni, en sýni sem tekin voru úti á landsbyggð-
inni voru yfirleitt geymd við + 4°C yfir nótt og send með fyrstu
flugvél til Reykjavíkur að morgni.
áður en hægt var að ákveða magn sérhæfðra inflúensumótefna í
hverju sermi, þurfti að hreinsa það, því að £ sermi geta verið
ýmsir þættir aðrir en sérhæfð mótefni, sem hindra samloðun blóð-
korna og trufla sérhæfða svörun Hl-prófsins. ósérhæfðu truflun-
arvaldarnir eru af tvennum toga. Annars vegar eru glýkoprótein,
sem eyðileggja má með perjoðíði, trypsíni eða "receptor destroying
enzyme" (RDE) úr Vibrio cholerae. í þessari rannsókn var notað RDE
og sermin meðhöndluð með því yfir nótt í 37°C heitu vatnsbaði.
Hins vegar eru þættir, sem þola illa hita, en þá var reynt að
eyðileggja í 56°C heitu vatnsbaði í 30 mínútur (3, 15). Þessa
meðferð þola sérhæfð mótefni vel. Svínasermi voru auk þess hreins-
uð með' kaólíni (10) .
Mótefnavakar, blóðkorn og önnur efni
Athuguð var svörun við þrem inflúensumótefnavökum, þ.e.
A/New Jersey/8/76 (HswlNl) (svínaveiru), A/Victoria/3/75 (H3N2)
og B/Hong Kong/5/72 (BXl-HP). Mótefnavakar og RDE voru frá
inflúensumiðstöð Alþjóðaheilbrigðisstofnunarinnar (WHO) í Atlanta,
Bandaríkjunum. Mannablóðkornalausnin var gerð úr blóði af 0 blóð-
flokki frá Blóðbankanum. Blóðið var tekið í Alsever-lausn, þvegið
þrisvar í PBS-dúa (buffer) og síðan útbúin 0,5% lausn. DÚar og
aðrar lausnir voru útbúnar í rannsóknastofunni, þ.e. phosphate
buffered saline (PBS) með pH 7,2, natríum citrat og kalsium salt-
vatn .