Heilbrigðisskýrslur - 01.12.1990, Blaðsíða 143

Pig. 4: Effects of glucagon or forskolin on
(A) VLDL triacylglycerol secretion, (B)
cellular levels of triacylglycerol, and (C)
ketogenesis in rat hepatocytes cultured in
medium enriched with camitine (final conc.
0-5 mM; oleate 0.75 mM). Cells were cultured
f°r 72 h in the carnitine-enriched
supplemented Waymouth's medium, the
medium being changed every 24 h. Glucagon
(10-7 M) or forskolin (10*4 M) was present
during the final 24 h of culture only (the data,
therefore, represent the effect of glucagon and
forskolin on day 3 of culture, only); x ± SEM;
n = 5; data are presented as % of control;
control = cells cultured in supplemented
Waymouth's medium without carnitine
added; *P < 0.05; **P < 0.01, compared with
control.
Primary cultures of rat hepatocytes
offer an advantage in these respects.
However, for longer-term studies (3
^Ays) they may not be entirely
satisfactory. This may result from the
mtracellular depletion of cofactors
ossential for the normal regulation of
hopatic lipid metabolism.
■^grip. í þessari stuttu grein er lýst tækni til þess að einangra og rækta
lifrarfrumur (hepatocytes) úr rottulifur. Efnablöndu með sérhæfðum hvata
(collagenase) var dælt margsinnis í gegnum rottulifur (inn um vena porta og út
Uln vena cava inferior í lokuðu hringrásarkerfi), og bandvefur lifrarinnar var
þannig meltur og frumurnar losaðar. Heilbrigðar frumur voru skildar frá í
skilvindu og einnig síaðar í gegnum net, og þeim var síðan sáð á skálar (Petri
diska) í þar til gerðan ætisvökva (Waymouth's medium). Frumurnar voru
ræktaðar í skálunum í allt að 3 sólarhringa og fituútskilnaður þeirra (VLDL-
'ítskilnaður þríglýseríða og kólesteróls) mældur á 24 klst. fresti á
ræktunartímabilinu, og var hann nokkurn veginn stöðugur. Þá voru athuguð
Áhrif efna á fituútskilnaðinn, sem juku framleiðslu og/eða þéttni cAMP í
frumunum. Þau efni, sem það gerðu og athuguð voru (glúkagon, forskólín,
lsóbútý]-methýlxanthine), drógu öll úr fituútskilnaði frumanna (þ.e. VLDL
utskilnaði þríglýseríða og kólesteróls), en jafnframt juku þessi efni ketógenesis
þeirra (útskilnað acetóacetats og hýdroxýbútýrats). En enda þótt fyrrnefnd efni
ykju ketógenesis, þá féll ketógenesis dag frá degi á ræktunartímabilinu, og því
Var karnitíni bætt í ætið (karnitín tekur þátt í flutningi fitusýra úr frymi inn í
°jkukornin (mitochondria, carnitine shuttle), þar sem fitusýrur oxíderast).
Karnitín (0.5 mM) jók framleiðslu acetóacetats og hýdroxýbútýrats mikið (mælt
a þriðja degi), og nú (á þriðja degi) gátu hin fyrrnefndu cAMP-aukandi efni ekki
aukið ketógenesis frekar. Karnitín olli einnig falli í VLDL-útskilnaði, en þó
141