Læknaneminn - 01.04.2010, Page 102

(c) Christchurch Hospital, Nýja Sjálandi
(d) Slökkvilið Höfuðborgarsvæðisins
Þann 17. janúar 2008 varö breyting á skipulagi
sjúkraflutninga é höfuðborgarsvæðinu.
Fram að því hafði sérstakur sjúkrabíll með
lækni farið í alvarlegustu útköllin en eftir
breytinguna sjá bráðatæknar um þessi útköll.
Bráðatæknar eru sjúkraflutningamenn með
sérhæfða menntun. Þeir njóta stuðnings
lækna um fjarskipti.
Rannsóknin gekk út á að bera saman gæði
sjúkraflutninga í bráðatilfellum fyrir og eftir
breytingu. Aðferðin til þess að meta gæðin
var sú að skoða meðferð ákveðinna hópa
bráðveikra sjúklinga út frá skilmerkjum um
gæði meðferðarinnar.
Rannsóknin var aftursýn og voru umrædd
tilfelli leituð uppi út frá númerum sjúkdóms-
greininga í sjúkraskrám Landspítalans. Síðan
var skoðað hvernig meðferð var hagað úti á
vettvangi. Kannað var hvort meðferðaraðili
á vettvangi hefði gert sér ástand sjúklingsins
Ijóst og hvort hann hefði beitt réttri meðferð.
Rannsakendur skilgreindu rétta meðferð fyrir
hvert tilfelli byggt á gagnreyndum heimildum
um meðhöndlun umræddra sjúkdómstilfella
úti á vettvangi. Alls voru í rannsókninni 105
tilfelli, þrírfjórðu tilfella voru bráð hjartaáföll.
Ekki kom fram tölfræðilega marktækur munur
á hlutfalli tilfella sem hlutu kjörmeðferð fyrir
og eftir þessa skipulagsbreytingu. Ef eitthvað
er gátu tölurnar bent til að þjónustan hafi
heldurbatnað.
Þýði rannsóknarinnar varð smátt, að miklu
leyti vegna þess að illa gekk að afla gagna
í hana. Stafaði það af því að skráningu
reyndist áfátt, bæði é sjúkrahúsinu og hjá
sjúkraflutningamönnum. Má jafnvel segja að
ein helsta niðurstaðan sé að skráningu þurfi
að bæta til muna.
Low scale production of lentivirus
Maria Hrund Stefansdottir, Aurelie Baudet
and Jonas Larsson
Department of Molecular Medicine and Gene
Therapy, Lund Stem Cell Center, Lund University
Hospital, Lund, Sweden
Objectives
Hematopoiesis refers to the dynamic process
of formation and development of cellular blood
components. All blood cell types are derived
from a multipotent precursor; the hematopoietic
stem cell (HSC) which by definition can both
differentiate into all blood cell lineages, and
self-renew, maintaining the HSC pool. The
molecular and genetic mechanisms regulating
self-renewal and differentiation of HSCs remain
poorly understood.
Today, genome-wide lentiviral shRNA
libraries, have been developed, yielding
a great number of potential modulators
of hematopoiesis. As an alternative to
genome-wide screen, we wish to develop
oriented screens, with 100 to 400 individual
constructs. The production of lentivirus for
such screen in traditional settings is not
effective to cover the vast number of shRNA
candidates, arising a need for an alternate
transfection strategy.
Materials and Methods
This study focuses on scaling down
the lentiviral production from a 10 cm
diameter plate to a 12 well plate setting.
Packaging (pAR8.91) and envelope (pMDG)
plasmids; and the transgene plasmid
(pLKOGFPscramblest'), were purified in large
and small scales, respectively. HEK 293T
cells were transfected with two strategies;
lipofection and calcium phosphate
transfection. Two different ratios of
packaging and envelope plasmids were also
tested. The produced lentivirus was used to
transduce cord blood derived CD34* cells.
Transfection and transduction efficiency were
evaluated by measurement of GFP expression
in 293T and CD34* cells using Fluorescence
activating cell sorter.
Results
The average transfection efficiency was
49.5% and 59.8% using lipofection and
calcium phosphate transfection respectively.
The average transduction efficiency was
3.134% and 4.78% using lipofection and
ratio 1 and 2 respectively while the average
transduction efficiency using calcium
phopspate and ratios 1 and 2 was 2,54% and
4.9% respectively.
Conclusions
The results were very variable in each experi-
ment. It is thus hard to conclude on the possi-
bility to scale-down the virus production.
The question still remains whether the
transfection efficiency could be enhanced.
Whether the ratios are a big factor regarding
transduction efficiency still needs to be
adressed in further experiments.
ífarandi sýkingar af völdum Haemophilus
spp. áíslandi 1983-2008
Marta Rós Bemdsen', Helga Erlendsdóttir2,
Magnús Gottfreðsson3
'Læknadeild Háskóla Islands, 2Sýklafræðideild LSH,
!SmitsJúkdómadeild LSH
inngangur
Haemophilus influenzae er litil, gramneikvæð
baktería. Hún er flokkuð eftir hjúptegund
í gerðir a - f, en getur einnig verið
óhjúpgreinanleg (NTHi). Fyrir bólusetningu
gegn hjúpgerð b (Hib) sem hófst 1989, voru
ífarandi sýkingar H. influenzae aðalega af
völdum Hib sem sýkti sérstaklega börn. NTHi
veldur nú flestum Hi sýkingum og sumar
rannsóknir hafa sýnt fram á aukningu þeirra
og annara ekki Hib stofna. Faraldsfræði og
birtingarmynd þessara sýkinga hefur breyst
gríðarlega eftir bólusetningu gegn Hib
og er markmið rannsóknarinnar að skoða
breytingarnará landsvísu.
Efniviður
Gerð var lýðgrunduð aftursæ (retrospective)
rannsókn sem tók til 206 sýkingartilfella af
völdum Haemophilus sp. é (slandi, 1983-
2008. Upplýsingar um jákvæða blóðræktun
og/eða ræktun úr mænuvökva fékkst hjá
Sýklafræðideild. Skráð voru einkenni sjúklings,
heilsufar, skoðun, niðurstöður rannsókna,
meðferð og fylgikvillar. Alvarleiki sýkinga
var metinn með APACHEII fyrir fullorðna og
PRISM III fyrir börn.
Niðurstööur
Fyrir bólusetningu, 1983 til 1989 voru 124
sýkingartilfelli þar af 104 (84%) börn.
Eftir bólusetningu, 1990 til 2008 voru 82
sýkingartilfelli þar af 27 (33%) börn. Fyrir
bólusetningu olli Hib 88% sýkinga en eftir
aðeins 19%. Algengasta greiningin fyrir
bólusetningu var heilahimnubólga af völdum
Hib en eftir lungnabólga og sýklasótt af
völdum ekki Hib. Aldursbundið nýgengi Hib
var hæst í aldurshópnum yngri en 1 érs bæði
fyrir (109/100.000/ér) og eftir bólusetningu
(3,8/100.000/ér). Eftirað bólusetningar hófust
lækkaði nýgengi Hib í öllum aldurshópum.
Aldursbundið nýgengi sýkinga af völdum ekki
Hib var hæst í ungum börnum og öldruðum
allt tímabilið. Nýburasýklasóttir af völdum Hi
eru 5% sýklasótta í nýburum og er nýgengi
þeirra 10,7/100.000/ár. í Hib sýkingum voru
veirusýkingar og miðeyrnabólgur algengustu
meðvirkandi þættir hjá börnum en reykingar
hjá fullorðnum. í ekki Hib sýkingum voru
veirusýkingar og lungnasjúkdómar algengustu
meðvirkandi þættir hjá börnum en hjarta-
og æðasjúkdómar hjá fullorðnum. Tveir
fullorðnir og eitt barn létust af völdum Hib.
Dánarhlutfall af völdum ekki Hib var hæst
hjá nýburum (22%) og öldruðum (13%-29%).
Þeir fullorðnir sem létust voru með marktækt
hærri stig á APACHE alvarleika kvarðanum
en þeir sem lifðu sýkinguna af (meðaltal
stiga 23,7 m.v. 13,2 p<0,05). Penicillín lyf voru
algengustu sýklalyfin allt tímabilið en notkun