Læknablaðið : fylgirit - 01.04.2011, Blaðsíða 40

VÍSINDI Á VORDÖGUM
FYLGIRIT 63
áhrif TGF-(fl og örvunar (aCD3/aCD28/IL-2) á tjáningu FoxP3 og
CD103.
Aðferðir: Óreyndar T frumur voru einangraðar úr naflastrengsblóði
og ræktaðar með aCD3, aCD28, IL-2 og TGF-pi. Tjáning á CD4, CD8,
CD103, CD49d Integrin b7 og FoxP3 var metin í frumuflæðisjá.
Niðurstöður: TGF-pi og IL-2 höfðu ekki áhrif á tjáningu CD103
eitt og sér óháð ræsingarskilyrðum. Hins vegar höfðu þau jákvæð
samverkandi áhrif á tjáningu CD103 meðal CD4+ og CD8+ T frumna við
öll prófuð ræsingarskilyrði. Áhugavert er að þessi áhrif náðu hámarki
þegar T frumur voru eingöngu örvaðar um CD3 (%CD103; CD4=1,26
±0,87(medium) vs. 6,12 ±2,88 (TGF+IL-2) og CD8=3,56±3,93(medium) vs.
51,38±23,90 (TGF+IL-2). IL-2 hafði einnig jákvæð áhrif á TGF-pi miðlaða
FoxP3 tjáningu CD4+ (tíföld aukning, p<,0001) og CD8+ (sexföld
aukning; p<,05) T fruma. CD28 hafði einnig marktæk jákvæð áhrif á
TGF-pi miðlaða FoxP3 tjáningu CD4+ T fruma (p<,01) en ekki CD8+ T
frumna. Að lokum reyndust IL-2 og TGF-pi hafa samverkandi áhrif á
samtjáningu CD103 og FoxP3 meðal CD4+ (p<,01) og CD8+ (p<,05) T
fruma. CD28 viðbótarörvun hafði svipuð samverkandi áhrif og IL-2 á
þessa samtjáningu.
Ályktun: Þessar niðurstöður benda til þess að stjórnunaráhrif TGF-pi á
tjáningu CD103 og FoxP3 sé háð IL-2.
V-102 Áhrif fiskolíu í fóðri músa á upphaf og hjöðnun bólgu í mBSA
miðlaðri lífhimnubólgu
Valgerður TómasdóttirUJ, Amór Víkingsson2, Jóna Freysdóttir2-3, Ingibjörg
Harðardóttir'
Tífefna- og sameindalíffræðistofu, læknadeifd HÍ, 2rannsóknastofu í gigtsjúkdómum,
3ónæmisfræðideild Landspítala
valgerd@hi.is
Inngangur: Tíðni langvinnra bólgusjúkdóma hefur aukist á
Vesturlöndum síðustu áratugi. Ein möguleg skýring á því er minnkuð
bólguhjöðnun samfara breyttu mataræði. Markmið rannsóknarinnar var
að ákvarða áhrif fiskolíu í fóðri músa á myndun og hjöðnun bólgu.
Efniviður og aðferðir: Kvenkyns C57BL/6J mýs fengu fóður með eða
án fiskolíu og voru bólusettar með metýleruðu BSA (mBSA) og mild
lífhimnubólga mynduð. Kviðarholsfrumum og -vökva var safnað á
nokkrum tímapunktum. Yfirborðssameindir á frumum voru skoðaðar
í frumuflæðisjá. Styrkur frumu- og flakkboða í kviðarholsvökva var
mældur með ELISA aðferð.
Niðurstöður: Fjöldi neutrófíla í kviðarholi náði hámarki 3 klst. eftir
myndun lífhimnubólgu hjá músum sem fengu fiskolíubætt fóður en 6
klst. eftir bólgumyndun hjá músum sem fengu viðmiðunarfóður. Fjöldi
neutrófíla varð meiri hjá músum sem fengu viðmiðunarfóður en hjá
þeim fengu fiskolíubætt fóður. Mýs á viðmiðunarfóðri höfðu einnig
hærri styrk af bólguboðefnunum IL-6 og CXCLl (KC) í kviðarholi en mýs
á fiskolíubættu fóðri. Fjörutíu og átta klst. eftir myndun lífhimnubólgu
var hlutfall eosínófíla í kviðarholi músa sem fengu fiskolíu hærra
en í viðmiðunarhópi og makrófagar tjáðu meira af hlutleysis
flakkboðaviðtakanum D6. Þá var styrkur TGFp í kviðarholsvökva einnig
hærri.
Ályktanir: Þessar niðurstöður sýna að mýs sem fá fiskolíubætt
fóður bregðast fyrr við bólguáreiti og fá minna bólgusvar en mýs á
viðmiðunarfóðri. Á síðari stigum bólgusvarsins eykur fiskolíugjöf
bólguhemjandi boðefni og tjáningu á sameindum sem eru mikilvægar
fyrir hjöðnun bólgu. Þannig er mögulegt að fiskolía flýti fyrir og dempi
bólguáreiti og stuðli síðan að öflugri bólguhjöðnun.
V-103 Hlutverk Sprouty-2 í greinóttri formgerð brjóstkirtils
Valgarður Sigurðsson1A, Sigríður Rut Franzdóttir1-* 2, Bylgja Hilmarsdóttir'- Þórarinn
Guðjónsson1-2, Magnús Karl Magnússon1-2-3
'Rannsóknastofu í stofnfrumufrceðum, lífvísindasetri Læknagarðs, 2rannsóknastofu í
blóðmeinafræði Landspítala, 3rannsóknastofu í lyfja og eiturefnafræði HÍ
valgardu@landspitai.is
Inngangur: Innanfrumustjómprótín sem tilheyra sprouty fjölskyldunni
hafa áhrif á virkni boða gegnum týrósín kínasa viðtaka sem em
mikilvægir í þroskun brjóstkirtilsins, þar með talið myndun greinóttrar
formgerðar. Fjögur mismunandi sprouty (Spry) gen finnast í spendýrum;
Spryl, 2,3 og 4, og gegna þau mikilvægu hlutverki í formgerðarmyndun
lungna, nýma og æðakerfis. Spry2 er talið mikilvægast í þessu samhengi
en tjáningamynstur og hlutverk þess í greinóttri formgerð brjóstkirtils
hefur lítið verið kannað.
Markmið: Skoða tjáningu og hlutverk Spry2 í greinóttri formgerð
brjóstkirtils.
Aðferðir: Tjáning Spry2 í vef og í hefðbundnum og þrívíðum
frumuræktunum (3D-rækt) var metin með mótefnalitunum,
mótefnablettun og rauntíma-PCR. Tjáning Spry2 í frumulínum var bæld
með sh-RNA lentiveiru innleiðslu (Spry2-KD). Til að rannsaka greinótta
formgerð voru notaðar brjóstastofnfrumur sem mynda greinótta
frumuklasa á 16 dögum (D16) í 3D-rækt.
Niðurstöður: Mótefnalitanir og blettun á músavef sýna að Spry2
tjáning eykst á þungunar- og mjólkunarstigi samfara vexti og greinóttri
formgerð mjólkurkirtilsins. f eðlilegum brjóstkirtli kvenna er tjáning
Spry2 aðallega bundin við kirtilþekju samanborið við vöðvaþekju. í
3D-rækt minnkar tjáning Spry2 þegar kóloníumar byrja að mynda
greinótta formgerð (D9-D10) en hækkar aftur þegar henni er lokið á D16.
Mótefnalitun staðfestir háa tjáningu Spry2 í greinóttum endum á D16.
Spry2-KD £ brjóstastofnfrumum leiðir til meiri vaxtarhraða og aukningu
í greinóttri formgerð í 3D-rækt.
Ályktun: Spry2 tjáning í manna og músa brjóstvef sveiflast í takt við
formgerðarmyndun og niðurstöður úr in vitro tilraunum gefa sterklega
til kynna að Spry2 hafi temprandi stjómun á greinótta formgerð
brjóstkirtils. Áframhaldandi vinna miðar að því að greina hvar Spry2 er
að miðla boðum sínum í þessu ferli.
V-104 Áhrif EGFR yfirtjáningar á brjóstastofnfrumulínu í þrívíðri rækt
Sævar Ingþórsson1-3, Þórarinn Guðjónsson13, Magnús Karl Magnússon1-2-3
'Rannsóknastnfu í stofnfrumufræðum, iífvísindasetri Læknagarðs, HÍ, 2rannsóknastofu í lyfja og
eiturefnafræði HÍ, 'rannsóknastofu í blóðmeinafræði Landspítala
saevarmgthors@gmail.com
Inngangur: Stofnfrumur eru nauðsynlegar til viðhalds á greinóttri
formgerð brjóstkirtilsins. Boð um týrósin kínasa viðtaka (RTK) boðleiðir,
þ.m.t. Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) viðtakafjölskylduna,
eru mikilvæg fyrir greinótta formgerð ýmissa vefja og gegna þeir
lykilhlutverki í meinmyndun krabbameina. EGFR viðtakar hafa verið
tengd brjóstakrabbameini af mörgum gerðum, meðal annars basal-líkum
brjóstaæxlum. Basal-lík brjóstakrabbamein hafa afar blandaða svipgerð
og hafa verið tengd stofnfrumum kirtilsins.
Markmið og aðferðir: Frumulínan D492 hefur basal svipgerð og getur
myndað greinótta formgerð í þrívíðri ræktim sem líkir eftir því sem sjá
má í brjóstkirtlinum. í verkefninu er ætlunin að koma D492 til að yfirtjá
EGFR próteinið og sívirkt afbrigði þess. Jafnframt var EGFR2 próteinið
yfirtjáð, en breytingar á EGFR2 tjáningu er tengt ákveðnum undirflokki
brjóstakrabbameina. Western blot og flúrljómandi mótefnalitun var beitt
40 LÆKNAblaðið 2011/97