Læknablaðið - 15.05.1998, Blaðsíða 14

376
LÆKNABLAÐIÐ 1998; 84
Niðurstöður
Söfnun naflastrengsblóðs og einangrun
einkjarna hvítfrumna: Meðalrúmmál safnaðs
naflastrengsblóðs úr 57 naflastrengjum var
43,8 ml. Meðalfjöldi hvítfrumna í naflastrengs-
blóðinu var 433,9xl06 frumur og heildarfjöldi
einkjarna hvítfrumna eftir einangrun á ísó-
paque/fícoll I02,7xl06 frumur (tafla I).
CD34 talning í frumuflæðisjá: Á mynd 1
má sjá dæmi um hvernig CD34 hlutfallið var
fundið í hverju sýni. Hlutfall CD34+ frumna af
CD45+ frumum í 40 naflastrengsblóðsýnum
var 0,93% (tafla II).
Klónógenískar ræktir: Á mynd 2A má sjá
kólóníu með rauðfrumusvipgerð (BFU-E) og á
mynd 2B kólóníu með hvítfrumusvipgerð
(CFU-GM). Fjöldi BFU-E var rúmlega helm-
ingi hærri en fjöldi CFU-GM (tafla II).
Frysting í fljótandi N; og þíðing frystra
sýna: Líftala einkjarna hvítfrumna eftir fryst-
ingu var 94,9% (± S.E.M.2,1). Ekki var mark-
tækur munur á kólóníuvexti fyrir og eftir fryst-
ingu (p=0,13 fyrir CFU-GM og 0,16 fyrir
BFU-E) (mynd 3). Fjöldi CFU-GM kólónía
fyrir frystingu var 266±47 en 245±45 eftir
frystingu. Fjöldi BFU-E kólónía fyrir frystingu
var 468±75 en 433±71 eftir frystingu. Niður-
stöður eru gefnar sem meðaltal±S.E.M.
Table I. The volume of blood and the number of leukocytes
from 57 umbilical cord blood samples.
(n) 3VX±S.E.M." Min-Max Median
Volume (ml) 57 43.8± 3.2 6.5- 107.0 42.0
2lWBCx106 57 433.9± 46.3 11.4-1121.3 483.9
3lMNCx106 57 102.7± 10.9 4.4- 364.1 79.8
" The results are presented as mean± standard error of the mean.
21 Total number of white blood cells.
31 Number of mononuclear cells isolated by the Isopaque/Ficoll grad-
ient centrifugation technique.
Table II. CD34 counting and colony formation (CFU-GM and
BFU-E) of MNC isolated from 40 umbilical cord blood sam-
ples.
(n) 3'/X±S.E.M.” Min-Max Median
CD34(%) 2|CFU-GM 40 0.93±0.14 0.09-4.80 0.75
/105 cells 3»BFU-E 40 238±26 27-760 207
/105 cells 40 506±82 21-2385 380
" The results are presented as mean± standard error of the mean.
21 (CFU-GM) Colony forming unit-granulocyte macrophage.
31 (BFU-E) Burst forming unit-erythroid.
Einangrun CD34+ frumna: í töflu III má
sjá niðurstöður einangrunar CD34+ frumna úr
fimm naflastrengjum. Hún var einungis gerð á
ferskum sýnum. CD19+ frumur voru hreinsað-
ar burt áður en einangrun CD34+ frumna var
gerð í sýnum 4 og 5.
CD45FTTC
CD45FTIC
Fig. 1. Estimation of CD34 proportion with double staining (CD45 vs. lgGl and CD45 vs. CD34) and FACS analysis.
A) Histogram showing intensity of CD45 expression on X-axis and cell numbers on Y-axis. Tlie CD45+ cells, which are on the
right side of the broken line (87.7%), are analysed further.
B) CD45 vj. lgGl (control).
C) CD45 vj. CD34. The proportion of cells showing non-specific staining is 0.21% (upper right in B) and the proportion of cells
showing CD34 staining is 2.10% (upper right in C). The CD34 proportion in this particular case will then be 2.10-0.21 = 1.89%.