Læknablaðið : fylgirit - 01.01.2011, Blaðsíða 128

XV VÍSINDARÁÐSTEFNA HÍ
FYLGIRIT 66
og stabíliseraðir eru með HPMC, gáfu háan styrk í bæði framhluta
(augnvökva) og afturhluta (sjónhimnu og sjóntaug) augans. Forðavirkni
augndropanna gerir það að verkum að hugsanlega nægir að gefa
dropana einu sinni á dag í stað þrisvar.
V 142 Dexametasón/sýklódextrín/pólýmer aggregöt í augndropum:
In vitro og ex-vivo rannsóknir
Phatsawee Jansook1-2, Einar Stefánsson13, Þorsteinn Loftsson12
'Oculis ehf., 2lyfjafræðideild, 3læknadeild HÍ, Landspítala
phj1@hi.is
Inngangur: Sýklódextrín (CD) mynda vatnsleysanlegar fléttur með
mörgum torleysanlegum lyfjum. Myndun slíkra fléttna getur aukið
leysanleika lyfjanna í augndropum, stöðugleika þeirra, upplausnarhraða,
aðgengi og dregið úr staðbundinni ertingu lyfjanna í augum.
Markmið verkefnisins var að rannsaka áhrif y-sýklódextríns (yCD) og
2-hýdroxýprópýl-Y-sýklódextrís (HPyCD) í biöndu á eðlisefnafræðilega
eiginleika dexametasóns (Dex). Áhersla var lögð á rannsóknir á kornum
og notkun þeirra í augndropa.
Efniviður og aðferðir: Dex/CD fléttukorn voru framleidd og
eðlisefnafræði kornanna rannsökuð með ýmsum aðferðum (til dæmis
Fourier transform infrared litrófsgreiningu, differential scanning
calorimetry, X-ray diffractometry og með upplausnarhraðaprófi).
Augndropar voru framleiddir sem innihéldu Dex, blöndur af yCD og
HPyCD, poloxamer 407 og pólývínýlpýrrólídón í vatni. Losun Dex úr
augndropunum var mæld og flutningur lyfsins í gegnum hvítu (sclera)
úr svínum rannsakaður.
Niðurstöður: Rannsóknir á eðlisefnafræði kornanna sýndu að þau
innihéldu fléttur Dex og vCD/HPyCD. Upplausnarhraði komanna og
losunarhraði lyfsins var miklu meiri en úr kornum sem innihéldu aðeins
annað hvort Dex/yCD eða Dex/HP'/CD fléttur. Með því að stjórna
yCD:HPvCD hlutfallinu var hægt að stjórna leysanleika lyfsins í vatni,
losunarhraða lyfsins úr augndropunum og flutningi þess í gegnum
hvítuna inn í augað.
Ályktanir: Blöndur yCD og HPyCD höfðu meiri leysanleika áhrif en
einstök sýklódextrín. Með því að stjóma yCDiHPyCD hlutfallinu í Dex/
CD fléttukornunum var hægt að stjórna losun Dex úr lyfjaforminu og
flutningu lyfsins í gegnum hvítuna.
V 143 Áhrif hýdrókortisóns á hópun 2-hýdroxyprópýl-p-sýklódextríns
Sergey V. Kurkov1, Amani E1 Fagui2, Catherine Amiel2, Þorsteinn Loftsson'
‘Lyfjafræðideild HÍ, 2East Paris Institute of Chemistry and Material Sciences, Frakklandi
kurkov@hi.is
Inngangur: Sýklódextrín em hringlaga fásykrungar sem hópa sig
stundum saman í vatnslausnum og mynda aggregöt. Markmið
verkefnisins er að rannsaka hópmyndun 2-hýdroxyprópýl-þ-
sýklódextríns (HPþCD) í vatnslausnum og áhrif hýdrókortisóns
(Hc) á hópmyndunina. Nokkrar óháðar aðferðir vom notaðar við
rannsóknirnar.
Efniviður og aðferðir: Samhengið á milli styrks og osmótísks
þrýstings (gufuþrýstings) var rannsakað með gufuþrýstings-osmómæli
(vapor pressure osmometry) og niðurstöðurnar notaðar til að meta
umfang hópmyndunarinnar (það er myndun aggregata), endurvarp
ljósgeisla (dynamic light scattering (DLS)) var notað til að ákvarða
stærðardreifingu agnanna og rafeindasmásjá (transmission electron
microscopy (TEM)) var notuð til að greina agnirnar í vatnslausnum sem
innihéldu HPþCD og Hc. Niðurstöður mælinganna vom bomar saman,
bæði innbyrðis og við niðurstöður sem birtar hafa verið í alþjóðlegum
tímaritum.
Niðurstöður: Mælingar á osmótískum þrýstingi lausna sem innihéldu
annars vegar HPjiCD og hins vegar blöndu af HPflCD og Hc við 25°C
gáfu til kynna að Hc auki hópmyndun HPþCD. DLS mælingamar
við 25°C sýndu að tvær agnastærðir voru til staðar í lausninni og var
sú minni á stærð við einstakar Hc/HPpCD fléttur. Hópmyndun í
hreinum HPpCD lausnum var nær engin. Þegar Hc var bætt í HPþCD
lausnirnar jókst hópmyndunin sem kemur heim og saman við mælingar
á breytingum á osmótískum þrýstingi. TEM myndir af Hc/HPpCD
lausnum sýndu nanóagnir sem voru þó nokkuð stærri en einstakar 1:1
Hc/HPpCD fléttur. Niðurstöðurnar koma heim og saman við birtar
rannsóknir okkar þar sem flæði um hálfgegndræpar himnur var notað
til að nema hópmyndun.
Ályktanir: Hópmyndun í hreinum vatnslausnum HPpCD er nær engin,
að minnsta kosti við þá HPpCD styrki þar sem mælingarnar voru gerðar.
Þegar Hc var bætt í HPpCD lausnimar hópuðu Hc/HPpCD flétturnar
sig saman og mjmduðu aggregöt. Tilgáta okker er að Hc/HPpCD fléttur
hópi sig saman til að mynda aggregöt sem líkjast mísellum.
V 144 Ensím fyrir framleiðslu á chondróitín súlfat fásykrum
Varsha A. Kale1,2, Jón Óskar Jónsson1, Ólafur Friðjónsson1, Guðmundur Ó.
Hreggviðsson1, Sesselja Ómarsdóttir2
’Matís ohf., 2lyfjafra‘ðideild HÍ
sesselo@hi.is
Inngangur: Rannsóknir hafa sýnt að chondróitín súlfat (CS) fjölsykrur,
sem er ein uppistaðan í byggingarefni brjóskvefs, hafa ýmiskonar
lífvirkni til dæmis áhrif á ónæmiskerfi, oxunarferla, bólguferla og gigt.
Hins vegar er talið að aðgengi fjölsykra úr meltingarvegi sé lítið en
frásog CS fásykra gæti verið meira. Því er markmið þessa verkefnis að
framleiða CS fásykmr úr brjósksykmm og nota til þess sérvirk ensím
sem klippa fjölsykrur niður í fásykrur.
Efniviður og aðferðir: Bakteríustofnar úr sjávammhverfi voru
einangraðir á lágmarksæti sem innihélt CS úr hákarlabrjóski, sem eina
kolefnisgjafa. Ensímvirkni í frumuútdrætti og floti nokkura stofna
var rannsökuð. Erfðamengi valins bakteríustofns var raðgreint með
FLX 454 raðgreini með 20 faldri þekju. Gen sem talið var skrá fyrir CS
niðurbrotsensím var magnað með PCR og klónað í tjáningarferju í E. coli.
Tjáning var virkjuð með rhamnósa. Ensímvirkni og niðurbrotsafurðir
vom rannsakaðar með CS hvarfefnum ásamt DiNitroSalicylic sýru (DNS)
ljósgleypnimælingum, þunnlagsskiljun (TLC) og háþrýstivökvaskilju
(HPLC).
Niðurstöður: Nokkrir stofnar sýndu töluverða CS niðurbrotsvirkni
og var einn þeirra (Arthrobacter stofn) valinn fyrir erfðamengja
raðgreiningu. Borin voru kennsl á gen ensímsins sem líktist þekktu CS
niðurbrotsensími (um það bil 35% amínósýru samsvörun). Genið var
klónað og tjáð í E. coli. Ensímið var því næst hreinsað og eiginleikar þess
kannaðir. Ensímið braut niður CS fjölsykrur úr hákarlabrjóski og brjóski
nautgripa í fásykrur á skilvirkan hátt. Hámarks virkni mældist við 40°C
og pH 7.
Ályktanir: Eiginleikar ensímsins gefa vonir um að nota megi það
við framleiðlu á CS fásykmm sem ef til vill verður hægt að hagnýta í
náttúrulyf eða fæðubótarefni.
128 LÆKNAblaðið 2011/97